Kit de extracción de ADN y ARN HCY™ 96

Por supuesto. Permítame brindarle información detallada sobre el Kit de extracción de ADN/ARN HCY™ 96.

Este es un kit de extracción de ácidos nucleicos de alto rendimiento diseñado para su uso en laboratorios que procesan una gran cantidad de muestras, como en diagnósticos clínicos, detección de patógenos e investigación genómica.

A continuación se presenta un desglose completo de sus características, principios, procedimientos típicos y aplicaciones.

Noticias

El proceso de Kit de extracción de ADN/ARN HCY™ 96 es un basado en perlas magnéticas sistema de purificación formateado para placas de 96 pocillosPermite la purificación simultánea de tanto ADN como ARN A partir de una sola muestra en un flujo de trabajo automatizado o semiautomatizado. Esto es crucial para aplicaciones como la detección de patógenos (p. ej., SARS-CoV-2, influenza, virus respiratorio sincitial), donde es común analizar múltiples dianas de una misma muestra.

Características clave

1. Alto rendimiento: Diseñado para placas de 96 pocillos, lo que lo hace ideal para procesar 96 muestras simultáneamente. Es compatible con plataformas automatizadas de manipulación de líquidos y procesadores de microesferas magnéticas.
2. Doble extracción: Coextrae eficientemente ambos ADN genómico y ARN total a partir de un único lisado de muestra. Esto ahorra tiempo, reactivos y material de muestra.
3. Tecnología de perlas magnéticas: Utiliza una matriz de perlas magnéticas de sílice para unir ácidos nucleicos. Este método es conocido por su alta pureza, rendimiento y facilidad de automatización en comparación con los métodos tradicionales de columna de centrifugación.
4. Alta pureza y rendimiento: Los tampones optimizados y los pasos de lavado eliminan inhibidores como proteínas, sales y otros contaminantes, lo que da como resultado ADN y ARN de alta calidad adecuados para aplicaciones posteriores sensibles.
5. Procedimiento rápido: Todo el proceso se puede completar en 20 a 40 minutos para una placa completa de 96 pocillos, dependiendo del equipo de automatización utilizado.
6. Amplia compatibilidad de muestras: Se puede utilizar con una variedad de tipos de muestras, incluidos:
   • Muestras de hisopos (nasofaríngeos, orofaríngeos)
   • Suero / Plasma
   • Sobrenadantes de cultivo celular
   • homogeneizados de tejidos
   • Fluidos corporales

Principio del método

El kit funciona según el principio de Purificación de ácidos nucleicos mediante perlas magnéticas de sílice:

1. Lisis: La muestra se lisa con un tampón salino caotrópico fuerte (que generalmente contiene clorhidrato de guanina o tiocianato de guanina). Este tampón desnaturaliza las proteínas, inactiva las nucleasas (ARNasas y ADNasas) y libera ácidos nucleicos (ADN y ARN) en la solución.
2. Encuadernación: En presencia del tampón de lisis y una solución de unión, los ácidos nucleicos se unen específicamente a la superficie de las perlas magnéticas recubiertas de sílice. Las sales caotrópicas alteran la estructura del agua, permitiendo que la cadena principal de fosfato de los ácidos nucleicos, con carga negativa, interactúe con la superficie de sílice, con carga positiva.
3. Captura y lavados: Se utiliza un soporte magnético (o una varilla magnética en un sistema automatizado) para inmovilizar los complejos de microesferas y ácido nucleico contra la pared del tubo/placa. Se retira el sobrenadante y las microesferas se lavan 2 o 3 veces con tampones de lavado con etanol. Estos lavados eliminan sales, proteínas, lípidos y otras impurezas sin eluir los ácidos nucleicos.
4. Elución: Tras un lavado final y un secado completo para eliminar el etanol residual, los ácidos nucleicos puros se eluyen de las microesferas utilizando un tampón hiposódico (p. ej., tampón TE o agua libre de nucleasas). El tampón de elución interrumpe la interacción entre la sílice y los ácidos nucleicos, liberándolos en la solución limpia final.

Flujo de trabajo típico (simplificado)

1. Preparar el lisado: Mezcle la muestra con proteinasa K (si es necesario) y tampón de lisis. Incube hasta completar la lisis.
2. Enlazar: Transfiera el lisado a una placa de 96 pocillos profundos. Añada las microesferas magnéticas y la solución de unión. Mezcle bien para que los ácidos nucleicos se unan a las microesferas.
3. Captura: Coloque la placa sobre un soporte magnético hasta que la solución se aclare. Aspire y deseche el sobrenadante.
4. Lavado 1: Agregue el tampón de lavado 1, mezcle para volver a suspender las perlas, captúrelas en el imán y deseche el sobrenadante.
5. Lavado 2: Agregue el tampón de lavado 2, mezcle, capture y deseche el sobrenadante.
6. Seco: Seque al aire el pellet de perlas durante unos minutos para asegurarse de que todo el etanol del tampón de lavado se haya evaporado.
7. Eluir: Añadir el tampón de elución, mezclar bien, incubar durante unos minutos y capturar las microesferas. El sobrenadante contiene el ADN/ARN purificado y se transfiere a una nueva placa o tubo.

Aplicaciones posteriores

El ADN y el ARN de alta calidad extraídos con este kit son adecuados para una amplia gama de aplicaciones sensibles de biología molecular:

• RT-PCR en tiempo real (qRT-PCR): La aplicación principal, especialmente para la detección viral (por ejemplo, pruebas de COVID-19).
• PCR
• Secuenciación de próxima generación (NGS)
• Análisis de microarrays
• Clonación
• Diagnóstico molecular

Resumen

El proceso de Kit de extracción de ADN/ARN HCY™ 96 Es una herramienta potente para laboratorios moleculares modernos que requieren eficiencia, escalabilidad y fiabilidad. Su formato de 96 pocillos con microesferas magnéticas es el estándar de la industria para laboratorios de diagnóstico e investigación de alto rendimiento, permitiendo la preparación rápida y precisa de ácidos nucleicos para análisis posteriores críticos.

Descargo de responsabilidad: Para obtener el protocolo más preciso y específico, consulte siempre las instrucciones oficiales del fabricante que vienen con el kit.