Kit de ADN polimerasa HCY™ Pfu

Kit de ADN polimerasa HCY™ Pfu

Debido a que Pfu tiene actividad exonucleasa de 3' a 5', la posibilidad de error durante la amplificación por PCR se reduce considerablemente y la fidelidad es 10 veces mayor que la de la ADN polimerasa Taq. La tasa de error de Pfu es mucho menor que la de Taq pero también menor que la de otras ADN polimerasas de alta fidelidad, como Vent, DeepVent, Pwo, Tli, etc. Por lo tanto, Pfu es a menudo la primera opción de las ADN polimerasas de alta fidelidad. Por lo tanto, a menudo se prefiere Pfu como una ADN polimerasa rentable de alta fidelidad.
La ADN polimerasa HCY™ Pfu tiene una alta eficiencia de amplificación y una velocidad de amplificación rápida (4 kb/min, 8 veces más rápida que la enzima Pfu ordinaria), lo que supera los defectos de la baja eficiencia de amplificación, el bajo rendimiento y la velocidad de amplificación lenta de la enzima Pfu ordinaria, y acorta en gran medida el tiempo de reacción.

Fuente

HCY™ Pfu DNA Polymerase es una DNA polimerasa recombinante de Pfu, que se modifica genéticamente mediante mutación y recombinación y se purifica mediante expresión en E. coli.

Usos

• PCR de alta fidelidad, mutación puntual, clonación por PCR de doble extremo plano, etc.
• Los fragmentos de ADN amplificados por la enzima Pfu tienen doble extremo plano, lo que puede usarse para la clonación de doble extremo plano pero no para la clonación de vector T convencional.
• dUTP y dITP o cebadores que contengan dUTP y dITP no se pueden utilizar en reacciones de amplificación por PCR mediadas por enzimas Pfu.

Definición de activación

Utilizando ADN de esperma de salmón activado como plantilla/cebador, la actividad de 10 nmol de nucleótidos completos ingeridos como insolubles en ácido se definió como 1 unidad de actividad (U) a 74°C durante 30 minutos.

Rendimiento de la ADN polimerasa HCY™ Pfu

Longitudes de fragmentos de amplificación de polímeros de ADN HCY™ pfu

• Los polímeros de ADN pfu HCY™ pueden amplificar fragmentos de 0.5 kb/1 kb/2 kb/5 kb de diferentes longitudes de ADN λ (0-5 kb) con alta eficiencia.
• M indica marcador de ADN DL10,00.

Sensibilidad de amplificación de polímeros de ADN HCY™ Pfu

• Amplificación del fragmento de 300 pb de E. coli con la adición de una concentración de plantilla de 0 pg/10 pg/100 pg/1 ng/10 ng/100 ng; Se puede ver que este producto puede amplificar genes de E. coli con una cantidad de plantilla de tan solo 1 ng.
• NC indica control negativo para la amplificación de la ADN polimerasa HCY™ Pfu sin plantilla.
• M indica marcador de ADN DL500.

Velocidad de amplificación de polímeros de ADN HCY™ Pfu

• El tiempo de extensión fue de 30 s/60 s/120 s. para amplificación de fragmentos diana de tamaño 0.5 kb/1 kb/2 kb/5 kb;
• Se puede observar que el tiempo de extensión de 30 seg. y 120 seg. puede amplificar bien fragmentos de ADN de 2 kb y 5 kb, respectivamente, lo que indica que el sistema de reacción de PCR con ADN λ como plantilla puede establecer el tiempo de extensión de acuerdo con 3 kb/min.
• M indica marcador de ADN DL10,000.

Control de calidad

• Pureza electroforética SDS-PAGE superior al 98%;
• Prueba funcional: sensibilidad, especificidad, reproducibilidad de la PCR;
• Sin actividad de nucleasa exógena, sin endonucleasa exógena y contaminación por exonucleasa;
• No hay expresión del residuo de ácido nucleico del huésped.

Precauciones: Este producto es únicamente para investigación científica y no puede usarse para procedimientos médicos o de diagnóstico en humanos o animales ni como alimento, cosméticos o productos para el hogar. Sin permiso, autorización o aprobación por escrito, este producto no se puede fabricar, licenciar para la venta, vender, importar o exportar, ni utilizar todas las patentes y marcas comerciales relacionadas con el producto.

Preparación del Equipaje

Condiciones de almacenaje

Para almacenamiento a largo plazo, guárdelo a -20 ℃ lejos de la luz. Si se requiere un uso frecuente, se puede dividir y almacenar a 4 ℃ para evitar la congelación y descongelación repetidas. Después de descongelar se debe mezclar bien para evitar que se generen muchas burbujas de aire.