IMDM (Medio Dulbecco Modificado de Iscove)

El medio de cultivo IMDM suplementado con selenio, HEPES, piruvato de sodio y aminoácidos y vitaminas adicionales sobre la base del medio DMEM es muy rico en nutrientes y es muy adecuado para el cultivo celular de alta densidad y proliferación rápida. Los medios IMDM no solo pueden hacer crecer células con requisitos nutricionales especiales (p. ej., linfocitos B de ratón, células B estimuladas con LPS, células hematopoyéticas de la médula ósea, linfocitos T y varias células de hibridoma), sino que también sirven como fluido base para algunos sueros únicos. medios libres.

Ingredientes del medio de cultivo IMDM

L-glutamina (Glutamina)

La L-glutamina (Glutamina) es un elemento nutritivo esencial en el cultivo celular, pero es inestable en solución y se degradará espontáneamente. La cantidad de L-glutamina se puede ajustar arbitrariamente según las necesidades de investigación del medio sin L-glutamina, y la adición de L-glutamina fresca o sus sustitutos en el momento del uso es más beneficiosa para el crecimiento celular.

L-alanil-L-glutamina (Ala-Glu), también conocida como alanil-glutamina y alanil-glutamil dipéptido, es un aditivo de cultivo celular avanzado que puede reemplazar directamente a la L-glutamina en el medio de cultivo celular. La l-glutamina es un nutriente esencial en el cultivo celular, pero es inestable en solución y, sin embargo, es inestable en solución y se degrada espontáneamente para producir amoníaco y ácido piroglutámico, de los cuales el amoníaco es dañino para las células, mientras que la L-alanil- La L-glutamina es muy estable en solución acuosa y no se degrada espontáneamente. El mecanismo de utilización celular es que durante el cultivo celular, las células liberarán gradualmente una peptidasa en el medio de cultivo para hidrolizar L-alanil-L-glutamil en L-alanina y L-glutamina, y luego las células absorberán y utilizarán estas dos hidrólisis. productos El proceso de utilización celular de L-alanil-L-glutamil es similar a la estrategia de cultivo de adición de flujo, en el sentido de que se agregan continuamente niveles bajos de L-glutamina al medio de cultivo, lo que aumenta la utilización de L-glutamina sin generar un exceso. amoníaco, que es más propicio para el crecimiento celular. L-alanil-L-glutamil puede reemplazar la L-glutamina equimolar, es adecuado para todas las células, requiere poca adaptación y puede extender el tiempo de cultivo celular. También puede extender el tiempo de cultivo celular y reducir el número de pases, lo que ahorra tiempo y dinero. Las células cultivadas en medio suplementado con L-glutamina mostraron una reducción más lenta de la actividad que las cultivadas en un medio suplementado con L-glutamina. El período de retraso ligeramente más largo se debe al tiempo requerido para la liberación de peptidasa y la digestión del dipéptido.

HEPES

HEPES es un excelente tampón biológico, que no tiene ningún efecto tóxico sobre las células. El medio con HEPES puede mantener un rango de pH constante durante un período de tiempo más prolongado, lo que puede evitar que el crecimiento celular se vea afectado negativamente por las grandes fluctuaciones de pH del medio de cultivo. Se puede utilizar en incubadoras sin CO2.

Solución de penicilina-estreptomicina

La solución de penicilina-estreptomicina, también conocida comúnmente como “antibiótico dual”, es el antibiótico más utilizado en cultivos in vitro para prevenir la contaminación microbiana, en el que la penicilina interfiere con la síntesis de la pared celular bacteriana y es particularmente eficaz contra las bacterias Gram-positivas, mientras que La estreptomicina inhibe la síntesis de proteínas bacterianas al unirse a la subunidad 30S del ribosoma bacteriano y es particularmente eficaz contra las bacterias. pero es particularmente efectivo contra bacterias Gram-negativas. La combinación de penicilina y estreptomicina puede prevenir la mayor parte de la contaminación bacteriana.

Este producto contiene aminoácidos, vitaminas, sales inorgánicas y muchos otros componentes necesarios para el cultivo múltiple de células, pero no contiene proteínas, lípidos ni ningún factor de crecimiento, por lo que el producto debe usarse con suero o aditivos sin suero.

Precauciones del medio de cultivo IMDM

• Este producto ha sido filtrado y desbacterizado y debe usarse con cuidado para una operación aséptica para evitar la contaminación.
• No congelar-descongelar el producto para mantener el mejor uso del producto.
• Este producto está destinado únicamente a la investigación científica o al uso de estudios adicionales, no para el diagnóstico o el tratamiento.