M199, Medium 199, fue diseñado por Morgan et al. en 1950. Se utilizó originalmente para la investigación nutricional de fibroblastos de embrión de pollo y se ha utilizado ampliamente en el cultivo de varias células animales, incluidas algunas células no mamíferas.
M199 es particularmente adecuado para el cultivo de células no transformadas. También se usa comúnmente en virología, producción de vacunas y cultivo de células epiteliales pancreáticas de rata y tejidos de cristalino de ratón. En comparación con otros medios basales, M199 contiene componentes únicos, que incluyen adenina, adenosina, hipoxantina, timina y otras vitaminas. M199 tiene dos componentes salinos equilibrados, el componente salino de Earle se usa comúnmente en ambientes con CO2 y el componente salino de Hank se usa en ambientes sin CO2.
Ingredientes de Médium 199
No gato.
L-glutamina
alanil-glutamina
sal de Earle
sal de Earle
sal de Earle
PSP
Solución de penicilina-estreptomicina
HCY-BCM12001
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HCY-BCM12001A
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HCY-BCM12002
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HCY-BCM12003
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HCY-BCM12004
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HCY-BCM12005
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HCY-BCM12006
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HCY-BCM12007
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HCY-BCM12010
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HCY-BCM12008
10×, sin L-glutamina, bicarbonato de sodio
L-glutamina (Glutamina)
La L-glutamina (Glutamina) es un elemento nutritivo esencial en el cultivo celular, pero es inestable en solución y se degradará espontáneamente. La cantidad de L-glutamina se puede ajustar arbitrariamente según las necesidades de investigación del medio sin L-glutamina. La adición de L-glutamina fresca o sus sustitutos en el momento del uso es más beneficiosa para el crecimiento celular.
L-alanil-L-glutamina (Ala-Glu), alanil-glutamina y alanil-glutamil dipéptido, es un aditivo de cultivo celular avanzado que puede reemplazar directamente a la L-glutamina en el medio de cultivo celular. La l-glutamina es un nutriente esencial en el cultivo celular, pero es inestable en solución y, sin embargo, es inestable en solución y se degrada espontáneamente para producir amoníaco y ácido piroglutámico, de los cuales el amoníaco es dañino para las células, mientras que la L-alanil- La L-glutamina es muy estable en solución acuosa y no se degrada espontáneamente. El mecanismo de utilización celular es que durante el cultivo celular, las células liberarán gradualmente una peptidasa en el medio de cultivo para hidrolizar L-alanil-L-glutamil en L-alanina y L-glutamina, y luego las células absorberán y utilizarán estas dos hidrólisis. productos El proceso de utilización celular de L-alanil-L-glutamil es similar a la estrategia de cultivo de adición de flujo en el sentido de que se agregan continuamente niveles bajos de L-glutamina al medio de cultivo, lo que aumenta la utilización de L-glutamina sin generar un exceso de amoníaco. , que es más propicio para el crecimiento celular. L-alanil-L-glutamil puede reemplazar la L-glutamina equimolar, es adecuado para todas las células, requiere poca adaptación y puede extender el tiempo de cultivo celular. También puede extender el tiempo de cultivo celular y reducir el número de pases, lo que ahorra tiempo y dinero. Las células cultivadas en medio suplementado con L-glutamina mostraron una reducción más lenta de la actividad que las cultivadas en un medio suplementado con L-glutamina. El período de retraso ligeramente más largo se debe al tiempo requerido para la liberación de peptidasa y la digestión del dipéptido.
Solución de penicilina-estreptomicina
La solución de penicilina-estreptomicina, también conocida comúnmente como “antibiótico dual”, es el antibiótico más utilizado en cultivos in vitro para prevenir la contaminación microbiana, en el que la penicilina interfiere con la síntesis de la pared celular bacteriana y es particularmente eficaz contra las bacterias Gram-positivas, mientras que La estreptomicina inhibe la síntesis de proteínas bacterianas al unirse a la subunidad 30S del ribosoma bacteriano y es particularmente eficaz contra las bacterias. pero es particularmente efectivo contra bacterias Gram-negativas. La combinación de penicilina y estreptomicina puede prevenir la mayor parte de la contaminación bacteriana.
Este producto contiene aminoácidos, vitaminas, sales inorgánicas y muchos otros componentes necesarios para el cultivo múltiple de células, pero no contiene proteínas, lípidos ni ningún factor de crecimiento, por lo que el producto debe usarse con suero o aditivos sin suero.
Precauciones a considerar
Este producto ha sido filtrado y desbacterizado y debe usarse con cuidado para una operación aséptica para evitar la contaminación. No congelar-descongelar el producto para mantener el mejor uso del producto. Este producto está destinado únicamente a la investigación científica o al uso de estudios adicionales, no para el diagnóstico o el tratamiento.
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El medio de cultivo MB 752/1 de Waymouth ahora se ha ampliado para el cultivo de órganos intactos, así como para muchas otras líneas celulares, como las células cancerosas.