Tipos de PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una técnica de biología molecular versátil que se utiliza para amplificar secuencias específicas de ADN o ARN. A lo largo de los años, se han desarrollado varios tipos de PCR para satisfacer diferentes necesidades de investigación y diagnóstico. A continuación se muestran algunos tipos comunes de PCR:

1. PCR convencional: Este es el método de PCR estándar que implica ciclos de desnaturalización, hibridación y extensión. Se utiliza para la amplificación, secuenciación y clonación de ADN en general.
2. PCR de transcripción inversa (RT-PCR): La RT-PCR se utiliza para amplificar el ARN en ADN complementario (ADNc) y, a menudo, se utiliza para estudiar la expresión genética. Dos variaciones comunes incluyen la RT-PCR cuantitativa (qRT-PCR) para cuantificar los niveles de ARN y la RT-PCR anidada para una mayor sensibilidad.
3. PCR en tiempo real (qPCR): La PCR en tiempo real permite la cuantificación de ADN o ARN durante el proceso de amplificación. Se utiliza ampliamente para el análisis de la expresión genética, la cuantificación de la carga viral y la genotipificación.
4. PCR multiplex: La PCR múltiple amplifica múltiples secuencias diana en una sola reacción. Es valioso para detectar múltiples patógenos o genotipar múltiples loci simultáneamente.
5. PCR anidado: La PCR anidada implica dos rondas de amplificación, donde el producto de la primera PCR sirve como plantilla para la segunda. Se utiliza para aumentar la especificidad y la sensibilidad, especialmente cuando se trabaja con ADN degradado o con pocas copias.
6. PCR de inicio en caliente: La PCR de inicio en caliente utiliza ADN polimerasas modificadas que son inactivas a temperaturas más bajas. Esto evita la amplificación no específica durante las etapas iniciales de la PCR y es particularmente útil cuando se trabaja con plantillas complejas.
7. PCR de alta fidelidad: La PCR de alta fidelidad emplea ADN polimerasas con capacidades de corrección para minimizar los errores durante la replicación del ADN. Es esencial para aplicaciones como la secuenciación y clonación de ADN.
8. PCR digital (dPCR): La PCR digital divide la muestra en miles de pequeñas reacciones, lo que permite la cuantificación absoluta de las moléculas de ADN o ARN objetivo. Es muy preciso y se utiliza en la detección y cuantificación de alelos raros.
9. PCR inversa: La PCR inversa amplifica fragmentos de ADN con secuencias conocidas en los extremos, lo que la hace útil para estudiar regiones desconocidas que flanquean secuencias conocidas.
10. PCR de colonias: La PCR de colonias se utiliza para detectar colonias bacterianas en busca de fragmentos de ADN específicos, a menudo después de experimentos de clonación.
11. PCR de extensión de superposición (empalme por extensión de superposición o SOE-PCR): SOE-PCR se emplea para crear moléculas de ADN quiméricas o realizar mutagénesis dirigida al sitio uniendo fragmentos de ADN con secuencias superpuestas.
12. PCR asimétrica: La PCR asimétrica utiliza un exceso de un cebador para amplificar preferentemente una cadena del ADN objetivo. Se emplea en secuenciación de ADN y genotipado.

Estas son sólo algunas de las muchas técnicas de PCR especializadas disponibles, cada una adaptada a requisitos específicos de investigación o diagnóstico. Los investigadores eligen el tipo apropiado de PCR según la naturaleza de su proyecto y la información que buscan obtener.