¿Cuál es el líquido en el medio de transporte de virus? ¿Por qué es rojo?

La prueba de ácido nucleico, como sugiere el nombre, es la recolección de ácidos nucleicos (usando hisopos nasales o hisopos orofaríngeos) y luego la amplificación por PCR para detectar la presencia de una secuencia objetivo para determinar si una especie está presente. Desde el brote de Covid-19, esta tecnología ha estado poco a poco en el ojo público.

Una vez recolectada la muestra biológica, es vital asegurarse de que el ácido nucleico se conserva intacto. Sin embargo, al igual que las bacterias, las células exfoliadas y otros componentes secretores pueden tener ingredientes activos que catalizan la escisión del ácido nucleico. En particular, el material genético de la Covid-19 es el ARN, que es más débil que el ADN y más fácil de lisar.

Por lo tanto, el medio de transporte viral (VTM) tiene una sola misión: mantener intacto el material genético en la muestra de prueba. Se puede dividir en dos medios de transporte dependiendo de si está inactivado.

Medio de transporte inactivo

El método más simple es matar todos los virus y células e inhibir todas las hidrolasas de ARN potenciales. Por ejemplo, los tensioactivos/sales de lisis se utilizan para destruir la estructura de la membrana de virus/células para que las proteínas virales pierdan actividad fisiológica. Las enzimas se inhiben con sales de guanidina (p. ej., isotiocianato de guanidina) para proteger el ácido nucleico, de forma similar al lisado de extracción de ácido nucleico (reactivo TRIzol). Se usa comúnmente para pruebas biológicas de rutina para evitar el riesgo de infección por aerosoles por virus transmisibles.

Tipo de inactivación de lisis libre de guanidina: se agrega un agente desnaturalizante de proteínas de sal no guanidina, que lisa el virus para inactivarlo y liberar ácidos nucleicos en la solución. No hay necesidad de extracción de ácido nucleico, adecuado para la amplificación directa por PCR (pero su capacidad de solubilidad y desnaturalización es relativamente débil en comparación con las sales de guanidina)

Medio de transporte no inactivado

Los medios de transporte no inactivantes están fabricados con disolventes orgánicos y materiales inertes diseñados para mantener la viabilidad de las muestras clínicas que contienen virus. Suprimen la contaminación microbiana y protegen las muestras durante el transporte y el procesamiento. Los principales componentes de un medio de transporte viral inactivado son la solución salina equilibrada de Hank basal. Se agrega anfotericina B para inhibir las bacterias y levaduras competidoras. El tampón HEPES se utiliza para mantener el nivel de pH adecuado.

Se debe priorizar la protección personal porque el VTM no inactivante contiene virus/bacterias viables. Existe el riesgo de que el investigador se infecte. Al mismo tiempo, se requiere un costoso transporte en cadena de frío para una conservación eficiente. Se puede utilizar para el aislamiento de virus, el cultivo y el desarrollo de vacunas.

Resumen

Aunque los dos medios de transporte tienen propósitos similares, aún existen algunas distinciones fundamentales. Mientras que el VTM no inactivado estabiliza la viabilidad celular/viral y evita la reproducción bacteriana, el VTM inactivado protege los ácidos nucleicos de los virus y las enfermedades celulares.

Por lo general, se agrega un indicador de pH a la solución para observar visualmente el estado de la solución (bajo diferentes valores de pH, los colores se alteran).

 La sal de sodio roja de fenol (CAS:34487-61-1) se usa ampliamente como indicador de pH. La solución es roja en neutro, amarilla en ácido y púrpura en alcalino. La solución se volverá amarilla si la solución está contaminada con bacterias y el pH disminuye. Si agrega vinagre a esta solución de color rojo fucsia, debe volverse amarilla, para que los amigos con condiciones puedan probarlo.

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