Mezcla de nutrientes F-12 de jamón en polvo

Ham's F-12 Nutrient Mixture contiene una gama más amplia de componentes que otros medios basales, incluidos zinc, putrescina, hipoxantina y timidina. A menudo se utiliza como medio basal para el cultivo sin suero y es especialmente adecuado para el cultivo de una sola célula y la clonación en condiciones de bajo nivel de suero. También es ampliamente utilizado para el cultivo de células cancerosas y células primarias como células de hígado de rata, células epiteliales de próstata de rata, condrocitos, células musculares de rata, células de embrión de pollo y más. Ham's F-12 no contiene proteínas, lípidos ni factores de crecimiento. Por lo tanto, es posible que deba complementarse con nutrientes y, por lo general, requiere la adición de suero fetal bovino (FBS) al 10%. Ham's F-12 utiliza un sistema tampón de bicarbonato y, por lo tanto, requiere un entorno de 5-10 % de CO2 para mantener el valor de pH fisiológico.
Ofrecemos varias formulaciones de medios Ham's F-12 modificados con diferentes componentes para una amplia gama de aplicaciones de cultivo celular.

Ingredientes de la Mezcla de Nutrientes F-12 de Jamón en Polvo

Este medio de cultivo de células en polvo seco Ham's F-12 debe complementarse con bicarbonato de sodio, ajustar el pH y filtrar durante la preparación. El plan de preparación detallado es el siguiente:

1. Agregue 950 ml de agua destilada al recipiente de mezcla lo más cerca posible del volumen final.
2. Agregue el medio de cultivo seco al agua a temperatura ambiente (15°C a 30°C) y revuelva suavemente. No caliente el agua.
3. Enjuague el interior del paquete para eliminar todo el polvo residual.
4. Agregue 15.7 ml de una solución de NaHCO75 de 3 g/l al medio.
5. Ajuste el valor de pH al pH de trabajo final deseado por debajo de 0.2 a 0.3 unidades agregando y agitando lentamente NaOH 1 N o HCl 1 N. El valor de pH puede aumentar de 0.1 a 0.3 unidades después de la filtración. El valor de pH de trabajo recomendado es 7.5-7.9.
6. Ajustar el volumen final con agua destilada.
7. Utilice inmediatamente un sistema de filtración de presión positiva para filtrar el medio a través de una membrana de filtro de 0.2 μm en un recipiente estéril.