Medio Esencial Mínimo en Polvo (MEM)

RPMI-1640 es un medio 5A de McCoy mejorado y tiene un efecto único en comparación con otros medios porque contiene el agente reductor glutatión y una alta concentración de vitaminas. RPMI 1640 contiene biotina, vitamina B12 y PABA, que no se encuentran en MEM y DMEM de Eagle. Además, el medio contiene concentraciones muy altas de las vitaminas inositol y colina. Se ha encontrado que el medio RPMI 1640 es adecuado para una variedad de células de mamíferos, incluidas las células HeLa, células Jurkat, células MCF-7, células PC12, células PBMC, astrocitos y células cancerosas, es uno de los medios más utilizados. RPMI 1640 El medio no contiene proteínas, lípidos ni factores de crecimiento. Por lo tanto, generalmente requiere un 10 % de suero fetal bovino (FBS) como complemento. RPMI 1640 utiliza un sistema tampón de bicarbonato de sodio (2.0 g/L) y, por lo tanto, requiere un entorno de 5-10 % de CO2 para mantener el pH fisiológico. Para una amplia gama de aplicaciones de cultivo celular, ofrecemos el medio modificado RPMI 1640 con varios componentes y el medio RPMI 1640 con componentes personalizables.

Ingredientes del medio RPMI-1640 en polvo

Este medio de polvo seco RPMI-1640 debe complementarse con bicarbonato de sodio, ajustar el pH y filtrar durante la preparación. El método de formulación detallado es el siguiente:

1. Agregue 950 ml de agua destilada a un recipiente de mezcla lo más cerca posible del volumen final.
2. Agregue medio seco a agua a temperatura ambiente (15°C a 30°C) y revuelva suavemente. No caliente el agua.
3. Enjuague el interior del paquete para eliminar cualquier resto de polvo.
4. Agregar 29.3 mL de solución de NaHCO75 de 3 g/L al medio.
5. Ajuste el pH de 0.2 a 0.3 unidades por debajo del pH de trabajo final deseado agregando y agitando lentamente NaOH 1 N o HCl 1 N. El pH puede aumentar de 0.1 a 0.3 unidades después de la filtración. El pH de trabajo recomendado es 7.1-7.4.
6. Ajustar el volumen final con agua destilada.
7. Inmediatamente procese el medio a través de la función de filtración de membrana de un filtro de 0.2 μm en un recipiente estéril usando un sistema de presión positiva.